race-60

the 60m race 怎么读?

楼主你好：RACE技术的原理和操作 近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5＇和3＇末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等（1988）发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5＇和3＇端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点（Frohman等，1995：Schaefer，l995： Chen，1998： Bespalova等，1998： Matz等11999）。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR技术的改进：改进之一是利用锁定引物（（lock docking primer）合成第一链cDNA，即在oligo（dT）引物的3＇ 端引入两个简并的核苷酸【5＇-Oligo（dT）16-30MN-3＇，M=A/G/C；N=A/G/C/T】，使引物定位在poly（A）尾的起始点，从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo（dT）与poly（A）尾的任何部位的结合所带来的影响；改进之二是在5＇ 端加尾时，采用poly（C），而不是poly（A）；改进之三是采用RNase H-莫洛尼氏鼠白血。病毒（MMLV）反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温（60℃ -70℃）有效地逆转录mRNA，从而消除了5＇端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响；改进之四是采用热启动PCR （hot start PCR）技术和降落PCR（touch down PCR）提高PCR反应的特异性。更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考国家标准物质建材标准物质 http://www.rmhot.com/plist_1/plist_1_28_0_1.html随着RACE技术日益完善，目前己有商业化RACE技术产品推出，如CLONTECH的MarathoTM技术和SMARTTM RACE技术。邢桂春等（2001）先后使用上述两种试剂盒进行RACE反应，结果发现使用MarathonTM所得到的片断总是比采用SMARTTM RACE试剂盒到所得到的片断短。其原因在于MarathonTM技术反转录反应往往不能真正达到mRNA的5＇ 末端。所以认为，进行RACE反应应当优选SMARTTM RACE试剂盒。以下就国内目前应用最广的SMARTTM RACE试剂盒为例，简要概述RACE技术的原理和操作过程。SMARTTM 3＇-RACE的原理利用mRNA的3＇末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA.然后用一个基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把目的基因3＇ 末端的DNA片段扩增出来。

请翻译成中文，谢谢

英文原文：

the 60m race

英式音标：

[ðə] [em] [reɪs] 。

美式音标：

[ðə] [em] [res]。

罪恶都市所有任务说明

RACE RACE(rapid-amplification ofcDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。

cDNA完整序列的获得对基因结构、蛋白质表达、基因功能的研究至关重要。 完整的cDNA 序列可以通过文库的筛选和末端克隆技术获得。

近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多新基因的方法和手段，如图谱技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3’末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。

经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点(Frohman等,1995:Schaefer,l995: Chen,1998: Bespalova等,1998: Matz等11999)。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR技术的改进:改进之一是利用锁定引物((lock docking primer)合成第一链cDNA,即在oligo(dT)引物的3'端引入两个简并的核苷酸【5'-Oligo(dT)16_30MN-3', M=A/G/C;N=A/G/C/T】，使引物定位在poly(A)尾的起始点，从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo(dT)与poly(A)尾的任何部位的结合所带来的影响;改进之二是在5‘端加尾时，采用poly(C)，而不是poly(A);改进之三是采用RNase H一莫洛尼氏鼠白血.病毒(MMLV)反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温h (60 度 -70度 )有效地逆转录mRNA，从而消除了5‘端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响;改进之四是采用热启动PCR (hot start PCR)技术和降落PCR(touch down PCR)提高PCR反应的特异性。

随着RACE技术日益完善，目前己有商业化RACE技术产品推出，如CLONTECH的MarathoTM技术和SMART TM RACE技术术。邢桂春等(2001)先后使用上述两种盒进行RACE反应，结果发现使用Marathon TM所得到的片断总是比采用SMARTsup]TMRACE盒到所得到的片断短。其原因在于Marathon TM技术反转录反应往往不能真正达到mRNA的5’末端。所以认为，进行RACE反应应当优选SMARTTM RACE盒。以下就国内目前应用最广的SMART TM RACE盒为例，简要概述RACE技术的原理和操作过程。 SMARTTM 3‘-RACE的原理是:利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把目的基因3‘末端的DNA片段扩增出来。

RACE的优点

与筛库法相比较，有许多方面的优点 。

1）此方法是通过PCR技术实现的，无须建立cDNA文库，可以在很短的时间内获得有利用价值的信息。

2）节约了实验所花费的经费和时间。

3）只要引物设计正确，在初级产物的基础上可以获得大量的感兴趣基因的全长。

实验室现有的RACE试剂盒的简介 。

􀂙RACE是一种从一个相同的cDNA模板进行5‘和3‘末端快速克隆的方法。此方法会产生较少的错误条带。此过程中使用的酶混合物非常适合长链PCR。

􀂙使用此方法的要求是必须知道至少23－28个核苷酸序列信息，以此来设计5’末端和3‘末端RACE反应的基因特异性引物（GSPs）。

RACE引物的设计：

基因特异性引物（GSPs）应该是：

􀂙23－28nt

􀂙50－70％GC

􀂙Tm值≥65度，Tm值≥70度可以获得好的结果 。

需要实验者根据已有的基因序列设计5‘和3‘RACE反应的基因特异性引物（GSP1和GSP2).由于两个引物的存在，PCR的产物是特异性的。

反应中涉及到的一些事项

􀂙cDNA的合成起始于polyA+RNA。如果使用其它的基因组DNA或总RNA，背景会很高。

􀂙RACE PCR的效率还取决于总的mRNA中目的mRNA的量和不同的引物有不同的退火和延伸温度。

􀂙在进行5‘和3’RACE PCR的时候应该使用热启动。

􀂙表4中给出了所有引物的相互关系。重叠引物的设计会对全长的产生有帮助。另外，重叠的引物可以为PCR反应提供一个对照。并不是绝对的要利用设计的引物产生重叠片段。

􀂙引物GSP中的GC含量要在50－70％之间。这样可以使用降落PCR。避免使用自身互补性的引物序列，否则会产生回折和形成分子内氢键。另外，避免使用与AP1互补的引物，尤其是在3‘末端。

如果要用重叠片段来检测设计的引物，GSp1和GSp2之间至少是100－200碱基。只有这样才可以用扩增的产物来鉴定设计的引物是否正确。

􀂙降落PCR可以明显的增加RACE PCR产物的特异性。在最开始的循环中，退火温度高于AP1引物的Tm值，可以增加对特异性条带的扩增。随后的退火和延伸的温度降回到AP1的温度，可以进行随后的PCR循环。

􀂙验证基因特异性引物的对照：

􀁜单个引物的阴性对照：只用一个引物GSP来进行阴性对照。这样不应该产生任何的条带。如果可以看到明显的产物，应该改变循环的参数，或重新设计原始引物。

􀁜利用两个GSPS进行阳性对照：（只有两个GSP可以产生重叠的时候才可以采用此步。）为了确定RNA样品中目的基因确实表达，利用两个GSP和接头连接的cDNA来产生阳性对照。可以产生两个引物之间的重叠大小的片段。如果没有这个片段，应该重复cDNA的合成，或者从一个不同的组织或细胞来源进行cDNA的合成。

􀂙制备和抽提polyA+RNA 。

不要使用DEPC处理过的水。

纯化完mRNA之后，利用琼脂糖凝胶电泳检测mRNA的质量。哺乳动物的mRNA样品是0.5－12kb的拖带，在其中有4.5和1.9kb的rRNA的条带。非哺乳动物的mRNA应略小 。

具体的实验步骤

cDNA第一条链的合成：

􀂃我们建议进行cDNA合成的对照反应，这样可以对样品的cDNA的合成进行鉴定。加入各种试剂之后，在气浴中42度保温一个小时。

注意：在水浴或酒精浴中保温回减少反应体积，从而降低第一链的合成效率。

将管放于冰上，以终止第一链的合成反应。

直接进行第二链的合成。

􀂃cDNA第二链的合成：

第二链合成的酶混合物中，含有聚合酶、RNaseH和连接酶。T4 DNA聚合酶的功能是补平dscDNA的末端。我们建议做阳性对照，试剂盒中提供人类骨骼肌的mRNA。

􀂃建议进行阳性对照,cDNA的质量取决于制备的polyA+RNA的质量。非哺乳动物样品的mRNA大约在0.5－3kb之间。

􀂃通过电泳检测cDNA的产量，与对照进行对比，这样可以有利于在以后的步骤中对cDNA进行稀释。

接头的连接及连接产物的稀释 。

􀂃按照程序进行连接反应。

􀂃如果没有对比样品和对照的产量，利用Tricine－EDTA buffer制备接头连接的dscDNA的1/50和1/250的稀释物，用两种稀释物进行以下的RACE PCR反应，直到鉴定出哪一种稀释可以得到好的效果。

RACE RACE－－PCRPCR扩增扩增 。

•进行5’和3’的RACE－PCR扩增。

•利用以下的程序进行降落PCR反应：

94度30秒

5个循环：94度5秒

72度4分

5个循环：94度5秒

70度4分钟

20－25个循环：94度5秒 。

68度4分钟

注意：

我们建议使用降落PCR反应，这就要求GSP的Tm值≥70度。

当循环结束时，利用1.2%琼脂糖凝胶电泳分析每一个管中的产物5μl，使用适当的分子量marker。

•可以根据你的基因的特异性来设计最理想的循环参数。如果看不到带或者只有微弱的带，在68度多加5个循环。最佳的延伸时间取决于扩增条带的长度。如果片断的长度在2－5kb的时候，经常使用4min，0.2-2kb的时候将延伸时间减到2－3min，对于5－10kb的条带，延伸时间增加到10min。

RACE产物的验证：

􀁻应该对RACE的片段进行验证,以此来确定是否已经扩增了理想的产物。如果得到的是多条带或者研究的是多基因家族的成员，验证是非常有用的。

􀁻有3种验证RACE产物的方法：

（1）比较由GSP和NGSP获得RACE产物。

（2）Southern blot 。

（3）克隆并测序

􀁻我们建议最好测得RACE产物的部分序列。有的时候需要嵌套引物的存在。

比较由GSP和NGSP获得RACE产物。

􀁻对于5‘末端的RACE产物，比较由AP1和GSP1扩增出来的产物和由AP1和NGSP1扩增出来的产物。

􀁻对于3‘末端的RACE产物，比较由AP1和GSP2扩增出来的产物和由AP1和NGSP2扩增出来的产物。这对于鉴定多条带是否是上一个PCR的特异性产物是非常有用的。

􀁻如果条带是正确的，在嵌套PCR反应中的条带应该是略微小一些。基本PCR和嵌套PCR产物的迁移率的不同取决于cDNA结构中GSP1和嵌套引物的位置。

RACE产物的克隆和测序：

􀁻可以利用胶回收试剂盒来回收RACE产物，此试剂盒适合回收2.5kb以下的RACE产物；对于长的片段，可以通过电洗脱获得好的结果。如果你选择使用其他的纯化方法，最后用Tricine－EDTA buffer 30μl重新悬浮DNA样品。

􀁻电泳5μl回收的样品来鉴定回收的质量。

􀁻将回收的PCR产物直接克隆到/A型的PCR克隆载体中。另外还可以利用接头和/或cDNA合成引物中的Not1、Srf1、Xma1、ECOR1等酶切位点，将产物克隆到常规载体中 。

对于5‘端的RACE产物，我们建议挑取至少8－10个不同的克隆以获得5‘端的最大可能性的序列。（反转录并不总是进行到mRNA模板的5’末端，尤其是长模板。另外，T4 DNA聚合酶会移走5‘末端的0－20个碱基。）

􀁻一旦鉴定了含有插入片断的克隆，应该获得多的序列信息。理想的是，可以对整个开放读码框进行测序。包括5‘和3‘的非翻译区。

全长cDNA的获得

􀁻通过部分或全部测序鉴定了RACE产物后，可以通过两种选择获得全长的cDNA。

通过PCR的方法。

通过克隆的方法。

通过PCR的方法获得全长cDNA：

􀂄扩增长的cDNA需要较长的延伸时间，但是如果延伸的时间过长，可以产生拖带，所以要慎重的设计引物。

􀂄根据从5‘和3‘RACE产物获得序列信息设计5’和3‘GSP引物。这些引物应该来自cDNA的3’或者5‘的末端，应该是23－28nt长。不应该在引物的末端加上限制性位点，这样会导致高背景。在某些时候可以设计3’和5‘的嵌套引物。但是还是应该先利用一对引物进行PCR反应。

通过PCR的方法获得全长cDNA：

􀂄进行如下的热循环：

94度30秒

25个循环94度5秒

72度2－15分钟

􀂄延伸的时间应该等于预期的cDNA长度加上2分钟。例如：预期得到6kb的条带，用6＋2＝8分钟的延伸时间。

􀂄注意：如果没有条带或者条带弱，增加5个循环；或者优化PCR的条件。

通过PCR的方法获得全长cDNA：

􀂄在1.2%的琼脂糖凝胶上分析5μl的样品。通常情况下，可以见到一条单一带，如果这样，利用胶来纯化全长的cDNA。

􀂄制备1.2%的TAE buffer制备琼脂糖凝胶。不使用TBE buffer，TBE的胶很难制备全长的cDNA。

􀂄将剩下的45μl反应物点样，选用适当的marker。

􀂄利用长波紫外观察cDNA（≥300nm）切下全长的cDNA。注意：应该尽量减少紫外对cDNA的照射。

通过PCR的方法获得全长cDNA：

􀂄利用胶回收试剂盒回收cDNA。此试剂盒适合回收2.5kb以下的RACE产物；对于长的片段，可以通过电洗脱获得好的结果。如果你选择使用其他的纯化方法，最后用Tricine－EDTA buffer 30μl重新悬浮DNA样品。

􀂄将全长的cDNA克隆到T/A型的PCR克隆载体中。

通过克隆产生全长的cDNA：

􀁺如果你已经获得了含有重叠部分的5‘和3’RACE产物，同时在cDNA的重叠部分含有一个酶切位点的话，通过克隆技术可以获得全长的cDNA。

􀁺利用酶切获得的3‘和5’扩增产物，并且利用T4 DNA连接酶将它们连接起来。利用接头和cDNA合成引物中的内切酶将最终的全长cDNA克隆到载体中。

􀁺在哺乳动物基因组中，NOT1和Srf1酶切非常稀少，大约106bp才出现一次，因此在绝大多数的cDNA中是不出现的。

race和ethnicity有什么区别？

==主流任务==

A. Ken Rosenberg(律师处)的任务 。

1.The party

来到的办公室，交谈后Ken让我去码头的游艇上参加本地黑帮的聚会。(要先去商店换衣服)在游艇上与Cortez交谈后，认识了他的女儿Mercedes，Mercedes给我指了指当地的主要黑帮头头。然后让我送她到Pole Position Club(脱衣舞俱乐部) 报酬:100 。

2.Back Alley Brawl 。

我来到Malibu Club，找到Kent Paul了解情况后。赶到Ocean Beach的一个小巷找到一个厨师，干掉他夺到电话并遇到Lance这时，来了三个大厨子。不要恋战，开Lance的车和他一起逃到枪店然后返回Ocean View. 报酬:200 。

3.Jury Fury

去Ken的办公室，他让我去恐吓两个陪审员。出门时，有个工人被车压死，捡起他的锤子赶到指定地点，不要将陪审员打死只须将他们的车砸坏就行。 报酬:400 。

4.Riot

在Ken的办公室结识了Carrinton，一个建筑公司老板。得到的任务是让我去一处建筑仓库引发一场暴动!先去换衣服，然后赶往建筑仓库(最好到警察局停车场捡手雷，那样过关会容易些)。发现工人在示威，我过去随便打了四个工人。暴动开始了!趁乱进入建筑仓库，炸毁三辆卡车。 报酬:1000 。

B. Avery Carrington(建筑工地处)的任务 。

1.Four Lron

在工地与Carrington交谈，将要去干掉一个爱打高尔夫的工头。先去衣店换一身高尔夫装(真难看)后去高尔夫球场，由于无法将武器带入高尔夫球场，只得用高尔夫球棒了。开小车到那个工头练球的地方，先上去放到一个守楼梯的保镖，然后下楼(不要和其他保镖纠缠)将上车逃跑的工头干掉。或者直接回到高尔夫球场大门口等他自投罗网。 报酬:500 。

2.Demolition Man 。

这回Carrington要将对面敌对公司未完工的大楼炸掉(真够狠的)，来到Top Gun卡车，用模型飞机飞到对面的大楼安装炸弹。建议先不要取炸弹，先飞到大楼里面的1，2，3，4层用螺旋桨干掉里面的工人和守卫。然后回来取炸弹，此时记时开始 ，操纵飞机来到各层有标记的油桶上方投放即可。 报酬:1000 。

3.Two Bit Hit

建筑老板Carrington为了在Little Havana和Little Haiti获取利润，想挑起古巴帮和海地帮的战争!于是让我化装城古巴人去干掉古巴帮的一个头目。驱车前往指定地点更换古巴帮衣服后驾车来到Little Haiti的指定地点，撞死附近的敌人后，头目会上灵车逃跑，在其侧面撞击直至其爆炸(尾随的话，它会扔棺材，车撞上即炸)!还有一种方法，可在Diaz豪宅的迷宫里找到狙击枪，这样可以直接将那个头目干掉，然后赶快离开Little Haiti这个区域。 报酬:2500 。

C. Juan Garcia Cortez- The Colonel(小码头处)的任务 。

1.Treacherous Swine 。

在游艇上，Cortez让我去做掉一个得罪过他的胖子Gonzalez，并给了我一把电锯。赶到Gonzalez家，(就在Malibu俱乐部停车场后面)在楼顶，Gonzalez发现了我，他的两个手下赶来对付我，用电锯锯断他们，发现Gonzalez跑下楼了，我也跟着下来。开车将他碾死。这时，会有2颗警星，在警察围捕下逃到喷漆处消除。 报酬:250 。

2.Mall Shootout 。

Cortez有一桩生意要做，让我到购物中心去见一个线人。但他中途叛变，逃走了。杀死伏击的枪手，及忙追了出去，发现那小子上了一辆PCJ600摩托车，坐上车，将他撞死!下车夺取文件夹后会有2颗警星。一路逃到小码头后既可。(建议这关开始时使用跑车) 报酬:500 。

3.Guardian Angels 。

开车到一个停车场取枪，这时Lance会出现，驱车和他一起到Ocean Beach的一处小巷，答应保护Diaz一行人与古巴帮的交易。上侧面的楼上持枪掩护。正在交易时，一伙海地帮的小流氓会来破坏交易。他们会分别先后从前面和后面的路杀来，在枪战中，要保护Diaz 和 Lance的安全。小心会有人从Lance后面的楼梯上来偷袭他。杀光他们后，有两个骑摩托的人抢走钱，其中一个被爆头，骑上他的车追另一个人将他杀死!取到钱箱之后返回交易点。 报酬:1000 。

4.Sir,Yes Sir

上校Cortez的一个买主想要一些军事装备，正好有一队军方车队在对岸的Little Havana附近向码头驶去。Cortez托我到对岸去，并在车队中抢一辆坦克!他一定是疯了，但没办法，只有照办。在下一个小码头驾船驶向对岸的码头Boatyard，上岸驱车赶往Little Havana的警察局附近，下车。车队也靠近了，当他们停在前面的商店时，坦克兵去商店买东西。此时我趁机冲过去进入 坦克，朝指定地点赶去。由于坦克有损坏度，一但损坏度满了坦克就爆炸了!!因此一路上警察采用自杀战术猛撞"我的"坦克，好不容易才赶到指定地点，将坦克开进车库既可。 报酬:2000 。

5.All Hands On Deck 。

Cortez上校准备离开这里，但他希望游艇驶到公海之前，让我来保护他。果然，游艇刚开动，就有八个敌人追了过来，他们上了小船从游艇后面追了过来，把他们一个一个干掉，否则他们会登上船的。前面的海面被一群敌人的船只堵死了。这时要尽快将那些船上的敌人消灭掉。如果他们的橡皮艇靠近，他们便会从游艇的前面登船。此时，天空飞来了一架直升飞机，趁它没降落前击落它，否则会有敌人机降下来。依次击落两架直升机，会有一架AH-64(阿帕奇)直升机飞来。我的天!赶快击落它。然后将前面堵路的船只击沉。Cortez给了我一艘快艇，跟我道了别。(本关最好要有重型武器) 报酬：5000 。

D. Ricardo Diaz- Coke Baron (中心岛豪宅处)的任务 。

1.The Chase

来到Diaz的豪宅，他正在因为****赛输了而大发雷霆，见到了我，想了一会儿才跟我谈起来。原来一帮小偷老来偷他的钱，为此他很头疼，于是他让我到一个多次光顾他豪宅的小偷家探查那些小偷到底将他的钱放到什么地方!驾车驶向指定地点，发现小偷家里没人。此时，那个小偷在楼上出现尔后马上从屋顶逃走了，追上去，但不能杀死他，一直走，然后跳到垃圾箱上，那个小偷竟然还有同伙接应!骑上小踏板，追!一路上躲闪四处乱飞的子弹，跟随他们来到了小毛贼的老巢。 报酬:1000 。

2.Phnom Penh '86 。

每次来到Diaz的豪宅都会看到他在发脾气，这回又把花瓶砸了。那帮小偷打电话给Diaz，可能在向他示威。Diaz忍无可忍，派我和Lance去小偷的老巢将钱抢回来。一路上和Lance聊着天，欣赏着美丽的海滨风光，真是其乐无穷。不多会儿来到了小偷巢穴的上空，我的M60机枪开始派上用场了，一场屠杀....消灭外围的敌人之后，我被机降在小偷老巢的门外，端着M60冲啊!杀到屋顶在一尸体旁取得钱箱。Lance开着直升机赶到接我回Diaz的豪宅了。 报酬:2000 。

3.The Fastest Boat 。

Diaz听说那帮小偷正在船坞改造一艘快艇，他想要那艘快艇。我只好帮他跑跑腿了，驾车开到Botyard，小心那帮小偷用的可是威力很大的冲锋枪，干掉Botyard的敌人，进入控制室，里面的三个工人向我扑来。敢跟拿枪的干!灭了他们。走到控制台，放下快艇。此时，会冲进一些小流氓，杀光他们进入快艇，会有3颗警星，一路上警察的快艇围追堵截，赶快开到Diaz豪宅后的码头吧! 报酬：4000 。

4.Supply & Demand 。

我和Lance受命驾驶刚偷来的快艇到内河航道的一艘船上拿取重要物品，途中，那帮小偷也来凑热闹，分别有6艘快艇分成3组向停泊那艘船的码头驶去。不能让他们得逞，赶快追击。可以从外海走，那样简单多了。一开船就往左边走，将通过两座大桥，不要理会那些敌人。通过第二座桥时，看看地图，拐几个弯就到了。当然如果你开快艇技术高，那也可以跟着敌人走，但较为困难。然后Lance开船，将后面的敌人消灭，注意岸边的敌人，还会有直升机出现，打落它。到达Diaz豪宅的码头即可。 报酬：10000 。

5.Rub Out (必须先完成Death Row) 。

我与Lance为Diaz卖命，但他却想杀死我的好兄弟Lance，这个仇一定要报。来到Diaz豪宅大门口等待Lance到来，Lance从后车厢拿出来两把M4A1，这枪用着很过瘾。Diaz通过监视器看到了我们，他的一帮手下也做好了准备。用狙击枪干掉豪宅门口的守卫，过去才发现大门锁着。从豪宅后面的右边的门走，一路杀到二楼，杀死Diaz办公室外的敌人。这时，Diaz走了出来，朝他扫射!他身负重伤，最后说了一句，“我相信你，Tommy。” “晚安，Diaz先生。”Lance说道。这时拥有了Diaz的豪宅，可以存盘/换衣。 报酬：50000 。

E. Kent Paul (Malibu Club处) 。

Death Row

接到Kent Paul的电话，说有要事。赶到Malibu Club，得知搭档Lance被Diaz关到Little Haiti的垃圾场。开辆快车，从高尔夫球俱乐部那边的大桥到垃圾场会快一些。如果Lance的生命减完任务就失败了，所以要快。开车冲进垃圾场，撞死看门的敌人，然后与剩下的敌人激战，注意仓库顶上有敌人。消灭完敌人，到仓库解救Lance之后驾车将Lance送到Downtown的医院。出垃圾场后会有Diaz的手下开跑车堵截。小心，不要让Lance死掉，一直将他送到医院。(在垃圾场干掉敌人后可以从他们身上找到许多钱,至少3000) 报酬：无 。

F. Tommy Vercetti- Criminal Empire (V点)的任务 。

1.Shakedown

有了自己的豪宅，扩大了实力.和Ken,Lance,Carrington三人一起参观刚到手的豪宅，我心里很得意。但这样下去不是办法，必须想一个来钱的道才能真正富起来，我们一致同意到周围的商店收取保护费。Lance一行人到Ocean Beach的酒吧收保护费。我独自去North Point Mall恐吓那些店主。在五分钟内来到North Point Mall并打碎所有红点显示的玻璃。听着那些店主的喊叫，心里真舒服。但此时会有警星出现，逃吧。 报酬：2000 。

2.Bar Brawl

我回到豪宅，发现Lance等人正在喝酒，一句话也不说。后来才知道有个酒吧拒绝交保护费，因为有一家保安公司抢先一步。我带上两个手下，赶到拒交保护费的Front Page Bar，杀死门口的保安公司守卫。引起了混乱，问酒吧老板保安公司的情况。之后在五分钟内赶到一处地点，杀死其他的保安公司守卫。此时会发生爆炸，有两个家伙骑着摩托车跑了，开车追上去撞死他们。

报酬：4000

3.Copland

返回豪宅，又出事了。刚被我恐吓的一个咖啡厅老板报了警，我和Lance决定将他的破咖啡厅炸了。增加警星引来警察 (至少要2颗警星)将警察引入指定车库后我门将他们干掉，换了身警服。来到North Point Mall，进入咖啡厅放炸弹，但头脑发昏 的我居然定在5秒钟后爆炸!赶快逃!咖啡厅爆炸了，我们赶紧逃出North Point Mall坐上车。这时会有5颗警星，连FBI也赶来了。 到喷漆处消除警星，赶到指定地点。 报酬：10000 。

4.Cap The Collector (在完成夜总会和印钞厂，码头等资产任务后出现) 。

印钞厂的老工人被打了，我问清情况，得知是Sonny指使他的手下干的。他们现在正在我的各个产业收钱。开快车赶到黄点，在黑手党收取全部产业钱之前将他们干掉!一共6个人3辆摩托车，最好用车撞死他们，那些混蛋去的第一个地方是我的Boatyard， 赶过去杀死他们，剩下的几个也好对付。 报酬: $30000 。

5.Keep Your Friends Close (在完成夜总会和印钞厂，码头等资产任务后出现) 。

Sonny带着他的一帮手下来到我的豪宅，他们不怀好意，想干掉我独吞我的全部资产。令我没想到的是Lance居然背叛了我! 站到了Sonny那一边，这时我才想到Diaz为什么要干掉Lance。我只得独自保卫我的办公室，那些黑手党会上来抢我的钱。他们 撬开保险柜，这时钱数在疯狂的减少。先干掉那些喽罗，然后Lance那小子会出现在二楼，追他上去，在顶楼看到他躲在箱子后面，打爆旁边的汽油桶，干掉那些黑手党。最后将Lance干掉。下楼后，遇到Sonny及其手下，先干掉他的两个手下，然后和Sonny单挑。

报酬：30000

====至此主要剧情任务全部通关==== 。

G. Love Fist (骷髅标志处)的任务 。

1.Love Juice

Kent Paul打电话给我说有活儿给我干，来到Downtown的指定地点。看到三个变态男正在录制唱片，那三个人的吼叫声真是让我忍受不了。看来那几个家伙需要一些毒品才可以提起精神来，我到指定地点为那三个变态买毒品，但那个毒贩收了我的钱却骑着摩托跑了，临走时还骂我是个傻帽。开车撞死那个家伙，夺到了放毒品的手提箱。这时，Kent打电话让我去接Cortez的女儿Merceds,开车到高尔夫球场附近接上Merceds。此时只有1分半钟的时间将她送到那三个变态的录音棚。建议去接Merceds前 。

使用PCJ600，速度快，体积小。 报酬：2000 。

2.Psycho Killer 。

那三个变态有一些新唱片要发售，委托我去现场察看。开着他们那辆速度极慢的加长礼车，赶到指定地点。发现有一个疯狂变态男枪杀了一名警卫，然后开车逃走了。只能开着那辆破车追赶，将那变态男干掉。 报酬：4000 。

3.Publicity Tour (在完成飞车党任务后出现) 。

那个跟Love Fist作对的变态男居然还没有死，与Love Fist坐他们的车去演唱会现场。但是那个变态男打电话说他在车上放了炸弹，已启动，只有全速前进而且不能减速，否则炸弹会爆炸。车必须保持全速，小心驾驶，在城区乱转，小心驾驶直到炸弹排除。 报酬：8000 。

H. Big Mitch Baker (黑桃心标志)的任务 。

1.Alloy Wheels of Steel 。

Kent介绍我认识了飞车党老大Baker，他想考验我驾驶弯把摩托的技术。驾驶摩托车与另外三个人比赛，一定要夺取第一名。如果你够棒的话，可以和他们公平比赛。也可以开辆大卡车来堵在他们的前面，那样可以占到些便宜。但不要碰住他们，也不要杀死他们，否则任务失败。绕着Downtown转一大圈后夺取第一名即可。 报酬：1000 。

2.Messing With The Man 。

飞车党老大Baker为了考验我，让我在Downtown将街道搞乱，拿着微冲射击看到的所有车辆。听到一声脆响，破坏程度就会增加一点，直到加满为止。在限定时间内完成。 报酬：2000 。

3.Hog Tied

当地一个盗窃团伙偷走了飞车党的一辆摩托，Baker让我抢回来，骑上摩托(最好用PCJ600,对面的橱窗里面有)。骑摩托到 Downtowo警察局那里，顺着停一辆警车的公路往前开，要最快速度。快到“丁”字路口时从右边人行道的楼梯冲上去飞到对面的楼房顶上。干掉房顶上的敌人，顺着楼梯下去，找到停放摩托车的车库，干掉保卫。骑上摩托车，这时应该向下楼的楼梯口方向驶去，会看到远处有一节楼梯，驾驶摩托车从楼梯飞到街道上。会有小偷驾车从后面追来最好下摩托将他们干掉。返回飞车党聚集地即可。 报酬：4000 。

I. Umberto Robina- The Cubans (Little Havana咖啡馆处)的任务 。

1.Stunt Boat Challenge 。

接到电话来到咖啡馆，见到古巴帮首领。他想试试我的身手，让我去开快艇。来到栈桥见到Rico，上快艇。开始时只要碰到第一个黄点，就会开始计时。3分钟之内跑完20余个路点。 报酬：1000 。

2.Cannon Fodder 。

古巴帮首领Umberto受到了海地人的侮辱，他发誓要报仇。整一辆车将3个古巴人带到海地人的基地，支援那里的古巴人。下车先将前面挡路的敌人干掉，然后有一个敌人在楼顶用狙击枪打死了几个古巴人。Rico呼叫援军，在同伴的掩护下，将楼顶的狙击手打死。大家一起冲进海地人的基地，发现是个陷井，和Rico一起开旁边的卡车逃到指定地点。(这里的敌人是打不完的，上卡车后会增加两颗警星) 报酬：1000 。

3.Naval Engagement 。

Umberto得知海地人正在和小流氓交易毒品，得去将毒品抢来。来到靠近码头的地方，找到Rico。由Rico驾船，开到中心岛一处别墅的码头，看到交易正在进行中。杀死所有船上的敌人，然后岸上把敌人全部干掉，注意房顶上有个小流氓会放冷枪。杀光他们后找到3个装毒品的手提箱。此时，会来两个海地人，他们将Rico连人带船一起炸了。干掉他们后，逃离到咖啡馆。(此时会有5颗警星) 报酬：4000 。

4.Trojan Voodoo (在完成海地帮任务后出现) 。

Umberto开始对海地人动手了，他想把海地人的基地炸上天。首先抢一辆海地人的车Voodoo(海地人首领胖女人家门口有一辆)然后带着同伴到指定地点和其余的人汇合。一起开进海地人的基地，开到仓库大门旁停下，出来肃清仓库内的敌人，不要着急装炸弹。先上楼梯去二楼装上炸弹，此时只有不到一分钟的时间，赶快装剩余的2颗炸弹。然后原路返回，发现海地人已经将大门口封死了，从右边的楼梯上房顶，远离基地。BANG!!海地人的基地飞上了天。 报酬：10000 。

J. Auntie Poulet- The Haitians (胖黑女人)的任务 。

1.Juju Scramble 。

上一次帮助Umberto拼命抢回来的三包毒品他竟然交给了警察，看来他是想灭掉海地人。Poulet让我去三个地点将那些毒品取回来。来到垃圾场附近，上楼见到第一个手提箱，此时开始计时，警察也出现了(会出现2颗警星)，不要跟他们纠缠，赶快到第二点去取另一个。最后取完第三个后警星变为四颗。赶快逃到胖女人那里吧! 报酬：1000 。

2.Bombs Away

古巴人有3艘快艇用来专门运送毒品，Poulet让我用遥控小飞机去炸毁那些快艇。来到Top Gun卡车，共有3架小飞机，到中心岛一处别墅的码头找到快艇，投放炸弹后岸上的古巴人会坐船和坐汽车逃走，不能让他们得逞了。这些飞机炸弹是无限的，尽管对准目标扔就是了。如果实再过不了关，有个比较麻烦的方法，但能保证你100%过关，控制飞机到那个别墅的码头，不要投炸弹，降落到地上，将古巴人一个一个撞死(撞4下死一个人)，然后开始练习投弹就行了。

报酬：2000

3.Dirty Lickin's 。

古巴人与海地人正在一起搏斗，胖女人Poulet让我用狙击枪掩护海地人。先到打斗现场对面的房顶上，然后站好位置用狙击步枪快速杀死古巴人。过一会儿会来一群古巴人增援，其中一个拿着东洋刀，东洋刀可是砍一下一个人的呦，先把拿着刀的那个家伙打死，剩下的就好办了。一定不能让海地人全部死亡。 报酬：4000 。

K. Phil Cassidy (P点)的任务 。

1.Gun Runner

Phil需要一些枪械，有一帮流氓在市内运送枪支，驾车追击那些车辆，撞击后拾取掉落的枪支。最好将那些车辆也一起打炸，不然会带来很大麻烦。还有一群骑小踏板的小流氓会找你的麻烦。杀死和击毁剩余的人员和车辆后过关。

报酬：2000

2.Boomshine Saigon 。

爱玩炸弹的Phil不小心被炸掉一只胳膊，我也被震的头昏眼花。但必须把Phil送到医院。开着吉普车好不容易才到达医院，但里面有很多警察要抓Phil。Phil改变主意坚持要去一个私人诊所，只好开车送他到Little Havana的一处小胡同。 报酬：4000 。

　

其他

0.夜幕降临时，街上会有很多妓女出现，驾驶两厢车（很多车不可以，自己慢慢摸索）停到她们身边，然后按喇叭。妓女会上车，然后停到一个没人的地方..车会不停的抖，最后妓女下车，收取200$。你的生命值可达到125。

1.摩托车可承载两人，直升机可承载四人。

2.击爆汽车或摩托车轮胎将降低行驶速度和操控性。

3.区别特技跳和普通跳，在于观察跳跃空中是否有慢动作回放。

4.驾驶坦克按小键盘4或5旋转炮台，ctrl键发射炮弹。

5.前往东岛警察局内换好警服，进入军事基地可不被士兵追杀。

6.西岛汽车展示厅旁的空地是与警察对抗的最佳地区，由于四周有铁丝网保护，没有警察能从地面逮捕你。

7.操作阿帕奇直升机和海洋巡逻艇时，左ctrl键是发射导弹；操作水陆两用直升机时，空格键是发射重机枪。

8.驾驶警车、救护车、消防车时，按shift键可开启警报，附近车辆将避开绕行。

9.拉响警报时，再次按下shift键将开启紧急警报，任何车辆都会避开绕行。

10.每换一次衣服可消除两颗警星，如果警星超过两颗就无能为力了。

11.坦克并非坚不可催，燃烧弹能在瞬间使它变成废铁。

12.西岛摩托黑帮对面有家商店，打碎玻璃能得到pcj600摩托车。

13.遥控直升机可用螺旋桨杀人，遥控轰炸机可用机头来撞人。

14.救护车不受沙滩打滑影响，可保持全速在沙滩上行驶。

15.当被警察通缉时，只要将汽车开进修车厂，待汽车翻新后，立即解除所有通缉警星。

16.完好无损的汽车进入修车厂将进行喷漆工作，以便从中选择自己喜欢的颜色。

17.驾驶sanchez摩托车，不断抬起摩托车前轮（小键盘6），当摩托车垂直地面只用后轮前进时，速度将达到平常的两倍。

18.汽车损坏不用花钱去修车厂修理，只需将汽车开进存盘点旁的车库，汽车会焕然一新。

19.获得乌兹冲锋枪和mp5后，驾驶交通工具时按e键和q键，再配合ctrl键能隔着窗户向外射击；摩托车可直接按ctrl键向前射击。

20.经常按住shift键进行奔跑，能不断提高汤米的耐力值，使他一次拥有更长的奔跑时间。

21.将mp3格式音乐拷贝至游戏安装目录mp3目录下，在驾驶汽车、快艇、飞机选择mp3电台便能欣赏音乐。

22.被警察逮捕或进入医院，汤米将丢失武器和装备并损失100元。

23.在hog tied任务与cannon fodder任务中，敌人没有数量限制，可自由射杀赚取金钱。

24.任务途中被警察逮捕或进入医院，会有出租车送你到任务起始点，但你要付出9元钱的代价。

25.进入比萨店吃比萨可补充生命值，到东岛购物中心吃夹心肉饼也能补充生命值。

26.如果汽车在存盘点附近起火，立即靠近存盘点选择取消保存，你会发现汽车上的火已经熄灭了。

27.回家休息能迅速恢复生命值，存档一次将使游戏时间推进6个小时，进入医院或警察局会使游戏时间推进12个小时。

28.城市区域内如果有多个黑帮管辖，可以故意在大街上挑起事非，待他们火并之后坐收渔翁之利。

29.存档文件默认保存于c:\my documents\gta vice city user files文件下，请一定记得随时备份。

30.游戏安装目录的skins目录下有汤米皮肤，你可以利用画图程序对图片进行简要修改，使汤米进行千奇百怪的变化。

31.驾驶摩托车面对较高的台阶时，可以先抬起前轮，在空中迅速压低车身（小键盘9），便能完成跳跃台阶的特技表演。

32.将汽车停放在高尔夫球场大门旁的压路筒旁，跳上汽车后就能携带武器不通过大门进入高尔夫球场，从而避开门卫武器检查。开船从海域进入高尔夫球场，或驾驶飞机从空中进入高尔夫球场也可躲避门卫武器检查。

33.高尔夫球场和飞机场有武器检查装置，被检查出的武器将永远存放在那里，等于是活动的武器获取地点。

34.抢车时，从主驾驶座一边能直接跳进车内（必须是敞篷车），从摩托车正前方能飞跃上车，可为抢车节药更多时间。

35.驾驶摩托车来到墙角，沿着墙缝不断前进，你会看到摩托车会在瞬间停留在墙壁上，做出精彩的空翻镜头。

36.海域中有很多岩石群，驾船来到岩石旁，跳上岩石顶可站在水中欣赏风景。

37.汽车和摩托车高速行驶时按f键可强行跳车，直升机下降时按f键能强行跳机。

38.城市内的桥梁栏杆并没有高度限制，算好时间和距离，可从桥上跳到行驶的快艇上，不必再去码头浪费时间。

39.城市飙车赛开始前，驾驶汽车从起跑点后加速前进，经过起跑线时故意撞击参加比赛的其他赛车，这样你已经取得了领先位置。

40.城市飙车赛前，可将距离较长的公交车或卡车停放在参加比赛的其他赛车前，这样在比赛时等于是先发制人。

41.车库可强行停放多辆汽车或摩托车。方法很简单，首先将汽车停进车库，再把第二辆准备停放的汽车或摩托车停放在车库前。下车靠进车库，待车库门开启时迅上车将汽车或摩托车开进车库。

42.车库还可停放直升机。先将直升机停放在正对车库门口的位置（注意微操作，不要让螺旋浆撞上车库大门），然后利用汤米身体将直升机推进车库。注意不同大小的车库用于存放不同类型的直升机，这样不必每次都前去找寻直升机。

43.渔厂码头、电影公司、飞机场停放有packer卡车，将这种汽车开到想要飞跃的地点。驾驶其他汽车利用packer卡车的斜坡飞跃，就能到达无法前往的区域。

44.第一次进入游戏，你只能在东岛活动，其实有4种方法前往西岛：①保证完成送100名乘客到指定地点，使出租车变为弹射式引擎。驾驶出租车来到东岛码头，从马路向码头地下停车场对面的栏杆全速前进，当接近栏杆时迅速按shift键弹射至石板路上，驾驶快艇前往西岛。②驾驶救护车到东岛码头任意一处紧闭的铁门前，倒车使救护车两个后轮悬挂于空中，但保证车身不要落于水中。接着找辆汽车停在救护车前，轻松跳到救护车顶，助跑跳至铁门后的石板路，驾驶快艇向西岛进发。③同样使用救护车，停放在中心岛大门旁的人行道上。跳上救护车，助跑跳进庄园内的植被上，一个漂亮的空翻，汤米进入了中心岛。④前往电影公司旁的大桥上，借助汽车跳到桥栏杆外，仔细观察桥下行驾的快艇。当快艇从桥下驶过时，算好时间和距离跳上快艇，解决驾驶员向西岛出发。

RACE PCR设计引物都有什么嘛原则和注意事项

区别如下：

1、race主要是从人种上，也就是体貌特征来区分的不同的race的。这个词多用于指人种，跟人的长相、体形这些有关系。

2、而ethnicity这个词是按文化区分的。这个跟人种没有太大关系，而跟语言、宗教、文字、起源这些有关系。

扩展资料

race释义

英 [reɪs] 美 [res]。

n.

赛跑; 民族; 人种; 竞争

v.

参加比赛; 使比赛; 快速移动; 剧烈跳动。

ethnicity

n.    种族地位，种族特点，种族渊源;    。

[例句]He said his ethnicity had not been important to him。

他说他的种族渊源对他向来都不重要。

原文地址：http://www.qianchusai.com/race-60.html