你说的是2011的赛程?
1、巴林大奖赛
比赛日期:3月11日-13日
正赛圈数:57圈
2、澳大利亚大奖赛
比赛日期:3月25日-27日
正赛圈数:58圈
3、马来西亚大奖赛
比赛日期:4月08日-10日
正赛圈数:56圈
4、中国大奖赛
比赛日期:4月15日-17日
正赛圈数:56圈
5、土耳其大奖赛
比赛日期:5月6日-8日
正赛圈数:58圈
6、西班牙大奖赛
比赛日期:5月20日-22日
正赛圈数:66圈
7、摩纳哥大奖赛
比赛日期:5月26日-29日
正赛圈数:78圈
8、加拿大大奖赛
比赛日期:6月10日-12日
正赛圈数:70圈
9、欧洲大奖赛
比赛日期:6月24日-26日
正赛圈数:57圈
10、英国大奖赛
比赛日期:7月8日-10日
正赛圈数:52圈
11、德国大奖赛
比赛日期:7月22日-24日
正赛圈数:60圈
12、匈牙利大奖赛
比赛日期:7月29日-31日
正赛圈数:70圈
13、比利时大奖赛
比赛日期:8月26日-28日
正赛圈数:44圈
14、意大利大奖赛
比赛日期:9月09日-11日
正赛圈数:53圈
15、新加坡大奖赛
比赛日期:9月23日-25日
正赛圈数:61圈
16、日本大奖赛
比赛日期:10月7日-9日
正赛圈数:53圈
17、韩国大奖赛
比赛日期:10月14日-16日。
正赛圈数:55圈
18、印度大奖赛
比赛日期:10月28日-30日。
正赛圈数:待定
19、阿布扎比大奖赛
比赛日期:11月11日-13日。
正赛圈数:55圈
20、巴西大奖赛
比赛日期:11月25日-27日。
正赛圈数:71圈
楼主参考
Aquatics(水上运动)
Swimming游泳
freestyle自由泳
backstroke仰泳
breaststroke蛙泳 。
butterfly蝶泳
individualmedley个人混合泳 。
freestylerelay自由泳接力 。
medleyrelay混合泳接力 。
Waterpolo水球
Diving跳水
10mplatformevent十米跳台 。
3mspringboardevent三米跳板 。
synchroniseddivingfrom10mplatform双人十米跳台 。
synchroniseddivingfrom3mspringboard双人三米跳板 。
Synchronisedswimming花样游泳 。
Archery(射箭)
Individualevents个人赛 。
Teamevents团体赛
Athletics(田径)
Track径赛
100m,200m,400m100米,200米,400米 。
800m,1,500m,5,000m,10,000m800米,1500米,5,000米,10,000米 。
110mhurdles,400mhurdles110米栏,400米栏 。
3,000msteeplechase3000米障碍赛 。
4x100mrelay,4x400mrelay4×100米接力,4×400米接力 。
Jumping跳跃
highjump跳高
polevault撑杆跳高
longjump跳远
triplejump三级跳远 。
Throwing投掷
shotput推铅球
discus掷铁饼
hammer掷链球
javelin标枪
Decathlon男子十项全能 。
Heptathlon女子七项全能 。
Roadevents公路赛
marathon马拉松
walk竞走
BallGames(球类运动)
Badminton羽毛球
men'ssingles男子单打 。
women'ssingles女子单打 。
men'sdoubles男子双打 。
women'sdoubles女子双打 。
mixeddoubles混合双打 。
Baseball棒球
Basketball篮球
Football足球
Handball手球
Hockey/FieldHockey曲棍球 。
Softball垒球
TableTennis乒乓球 。
Tennis网球
Volleyball排球
BeachVolleyball沙滩排球 。
Cycling(自行车)
Roadcycling公路自行车赛 。
Trackcycling场地自行车赛 。
sprint追逐赛
timetrial计时赛
pointsrace计分赛
pursuit争先赛
Mountainbike山地自行车赛 。
Equestrian(马术)
Jumping障碍赛
Dressage盛装舞步
Eventing三日赛
Fencing(击剑)
Foil花剑
Epee重剑
Sabre佩剑
Gymnastics(体操)
ArtisticGymnastics竞技体操 。
FloorExercises自由体操 。
PommelHorse鞍马
Rings吊环
Vault跳马
ParallelBars双杠 。
HorizontalBar单杠 。
UnevenBars高低杠
BalanceBeam平衡木 。
RhythmicGymnastics艺术体操 。
GymnasticsTrampoline蹦床 。
ModernPentathlon(现代五项)
Shooting射击
Fencing击剑
Swimming游泳
Riding马术
Cross-countryrunning越野跑 。
Sailing(帆船)
Windsurfermen/women-Mistralonedesign男子/女子帆板米氏级 。
Single-handedDinghyWomen-Europe女子帆船欧洲级 。
Single-handedDinghymen-Finn男子帆船芬兰人级 。
Single-handedDinghyopen-Laser激光级 。
Double-handedDinghymen/women-470男子/女子帆船470级预赛 。
Double-handedDinghyopen-49er49人级 。
Multihullopen-Tornado龙卷风级 。
Keelboatmen-Star男子星光级 。
Keelboatwomen-Yngling女子索林级 。
Shooting(射击)
10mairrifle10米气步枪 。
10mairpistol10米气手枪 。
Men's10mrunningtarget男子10米移动靶 。
Men's50mrifleproneposition男子50米步枪卧射 。
50mriflethreepositions50米步枪3种姿势 。
Men's50mpistol男子50米手枪 。
Women's25mpistol女子25米手枪 。
Men's25mrapidfirepistol男子25米手枪速射 。
Trap多向飞碟
Doubletrap双多向飞碟 。
Skeet双向飞碟
Triathlon(铁人三项)
Swimming游泳
Cycling自行车
Running跑步
Weightlifting(举重)
Snatch抓举
Cleanandjerk挺举 。
Wrestling(摔跤)
greco-roman古典式摔跤 。
freestyle自由式摔跤 。
Rowing(赛艇)
Boxing(拳击)
Canoeing(皮划艇)
Judo(柔道)
Taekwondo(跆拳道)
魔兽争霸3冰封王座命令如下:
pointbreak - 清除食物限制。
strengthandhonor - 无敌环境。
allyourbasearebelongtous - 直接胜利。
whosyourdaddy -神化模式。
sharpandshiny - 研究升级。
motherland - 选择等级。
daylightsavings - 设定白天的时间。
thereisnospoon 无限魔法。
lightsout 设置晚上时间。
daylightsavings 白昼连续开关。
greedisgood =黄金木材各加500单位。
KeyserSoze =加黄金。
LeafItToMe =加木材。
PointBreak =加人口上限。
iseedeadpeople =显示全部地图。
WhoIsJohnGalt =研发加速。
WarpTen =快速建筑
无敌并一击必杀: whosyourdaddy。
无限能量: thereisnospoon。
任务模式里即使失败也继续游戏: strengthandhonor。
地图全开: iseedeadpeople。
立即胜利: allyourbasearebelongtous。
立即失败: somebodysetusupthebomb。
禁止任务默认的胜利条件: itvexesme。
加黄金: keysersoze [黄金数量](如果未指定数量默认增加500)。
加木材: leafittome [木材数量](如果未指定数量默认增加500)。
加黄金和木材: greedisgood [数量](如果未指定数量默认增加500)。
快速建造: warpten
无人口上限: pointbreak。
快速研究技能: whoisjohngalt。
快速升级: sharpandshiny。
解除科技树限制: synergy。
将时间直接设定到白昼: riseandshine。
将时间直接设定到夜晚: lightsout。
设定具体时间: daylightsavings [小时数]。
让时间永远停留在白昼: daylightsavings。
等级选择: motherland [种族] [等级]。
扩展资料:
其他类型命令:
1. 无敌并一击必杀:whosyourdaddy。
2. 无限能量:thereisnospoon。
3. 任务模式里即使失败也继续游戏:strengthandhonor。
4. 地图全开:iseedeadpeople。
5. 立即胜利:allyourbasearebelongtous。
6. 立即失败:somebodysetusupthebomb。
7. 禁止任务默认的胜利条件:itvexesme。
8. 加黄金:keysersoze [黄金数量](如果未指定数量默认增加500)。
9. 加木材:leafittome [木材数量](如果未指定数量默认增加500)。
10. 加黄金和木材:greedisgood [数量](如果未指定数量默认增加500)。
11. 快速建造:warpten。
12. 无人口上限:pointbreak。
13. 快速研究技能:whoisjohngalt。
14. 快速升级:sharpandshiny。
15. 解除科技树限制:synergy。
参考资料:百度百科-魔兽争霸Ⅲ:冰封王座。
RACE RACE(rapid-amplification ofcDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。
cDNA完整序列的获得对基因结构、蛋白质表达、基因功能的研究至关重要。 完整的cDNA 序列可以通过文库的筛选和末端克隆技术获得。
近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多新基因的方法和手段,如图谱技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3’末端的有效方法,以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。
经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术,主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端,包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善,克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点(Frohman等,1995:Schaefer,l995: Chen,1998: Bespalova等,1998: Matz等11999)。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR技术的改进:改进之一是利用锁定引物((lock docking primer)合成第一链cDNA,即在oligo(dT)引物的3'端引入两个简并的核苷酸【5'-Oligo(dT)16_30MN-3', M=A/G/C;N=A/G/C/T】,使引物定位在poly(A)尾的起始点,从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo(dT)与poly(A)尾的任何部位的结合所带来的影响;改进之二是在5‘端加尾时,采用poly(C),而不是poly(A);改进之三是采用RNase H一莫洛尼氏鼠白血.病毒(MMLV)反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温h (60 度 -70度 )有效地逆转录mRNA,从而消除了5‘端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响;改进之四是采用热启动PCR (hot start PCR)技术和降落PCR(touch down PCR)提高PCR反应的特异性。
随着RACE技术日益完善,目前己有商业化RACE技术产品推出,如CLONTECH的MarathoTM技术和SMART TM RACE技术术。邢桂春等(2001)先后使用上述两种盒进行RACE反应,结果发现使用Marathon TM所得到的片断总是比采用SMARTsup]TMRACE盒到所得到的片断短。其原因在于Marathon TM技术反转录反应往往不能真正达到mRNA的5’末端。所以认为,进行RACE反应应当优选SMARTTM RACE盒。以下就国内目前应用最广的SMART TM RACE盒为例,简要概述RACE技术的原理和操作过程。 SMARTTM 3‘-RACE的原理是:利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物,用一个含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为下游引物,以cDNA第一链为模板,进行PCR循环,把目的基因3‘末端的DNA片段扩增出来。
RACE的优点
与筛库法相比较,有许多方面的优点 。
1)此方法是通过PCR技术实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有利用价值的信息。
2)节约了实验所花费的经费和时间。
3)只要引物设计正确,在初级产物的基础上可以获得大量的感兴趣基因的全长。
实验室现有的RACE试剂盒的简介 。
RACE是一种从一个相同的cDNA模板进行5‘和3‘末端快速克隆的方法。此方法会产生较少的错误条带。此过程中使用的酶混合物非常适合长链PCR。
使用此方法的要求是必须知道至少23-28个核苷酸序列信息,以此来设计5’末端和3‘末端RACE反应的基因特异性引物(GSPs)。
RACE引物的设计:
基因特异性引物(GSPs)应该是:
23-28nt
50-70%GC
Tm值≥65度,Tm值≥70度可以获得好的结果 。
需要实验者根据已有的基因序列设计5‘和3‘RACE反应的基因特异性引物(GSP1和GSP2).由于两个引物的存在,PCR的产物是特异性的。
反应中涉及到的一些事项
cDNA的合成起始于polyA+RNA。如果使用其它的基因组DNA或总RNA,背景会很高。
RACE PCR的效率还取决于总的mRNA中目的mRNA的量和不同的引物有不同的退火和延伸温度。
在进行5‘和3’RACE PCR的时候应该使用热启动。
表4中给出了所有引物的相互关系。重叠引物的设计会对全长的产生有帮助。另外,重叠的引物可以为PCR反应提供一个对照。并不是绝对的要利用设计的引物产生重叠片段。
引物GSP中的GC含量要在50-70%之间。这样可以使用降落PCR。避免使用自身互补性的引物序列,否则会产生回折和形成分子内氢键。另外,避免使用与AP1互补的引物,尤其是在3‘末端。
如果要用重叠片段来检测设计的引物,GSp1和GSp2之间至少是100-200碱基。只有这样才可以用扩增的产物来鉴定设计的引物是否正确。
降落PCR可以明显的增加RACE PCR产物的特异性。在最开始的循环中,退火温度高于AP1引物的Tm值,可以增加对特异性条带的扩增。随后的退火和延伸的温度降回到AP1的温度,可以进行随后的PCR循环。
验证基因特异性引物的对照:
单个引物的阴性对照:只用一个引物GSP来进行阴性对照。这样不应该产生任何的条带。如果可以看到明显的产物,应该改变循环的参数,或重新设计原始引物。
利用两个GSPS进行阳性对照:(只有两个GSP可以产生重叠的时候才可以采用此步。)为了确定RNA样品中目的基因确实表达,利用两个GSP和接头连接的cDNA来产生阳性对照。可以产生两个引物之间的重叠大小的片段。如果没有这个片段,应该重复cDNA的合成,或者从一个不同的组织或细胞来源进行cDNA的合成。
制备和抽提polyA+RNA 。
不要使用DEPC处理过的水。
纯化完mRNA之后,利用琼脂糖凝胶电泳检测mRNA的质量。哺乳动物的mRNA样品是0.5-12kb的拖带,在其中有4.5和1.9kb的rRNA的条带。非哺乳动物的mRNA应略小 。
具体的实验步骤
cDNA第一条链的合成:
我们建议进行cDNA合成的对照反应,这样可以对样品的cDNA的合成进行鉴定。加入各种试剂之后,在气浴中42度保温一个小时。
注意:在水浴或酒精浴中保温回减少反应体积,从而降低第一链的合成效率。
将管放于冰上,以终止第一链的合成反应。
直接进行第二链的合成。
cDNA第二链的合成:
第二链合成的酶混合物中,含有聚合酶、RNaseH和连接酶。T4 DNA聚合酶的功能是补平dscDNA的末端。我们建议做阳性对照,试剂盒中提供人类骨骼肌的mRNA。
建议进行阳性对照,cDNA的质量取决于制备的polyA+RNA的质量。非哺乳动物样品的mRNA大约在0.5-3kb之间。
通过电泳检测cDNA的产量,与对照进行对比,这样可以有利于在以后的步骤中对cDNA进行稀释。
接头的连接及连接产物的稀释 。
按照程序进行连接反应。
如果没有对比样品和对照的产量,利用Tricine-EDTA buffer制备接头连接的dscDNA的1/50和1/250的稀释物,用两种稀释物进行以下的RACE PCR反应,直到鉴定出哪一种稀释可以得到好的效果。
RACE RACE--PCRPCR扩增扩增 。
•进行5’和3’的RACE-PCR扩增。
•利用以下的程序进行降落PCR反应:
94度30秒
5个循环:94度5秒
72度4分
5个循环:94度5秒
70度4分钟
20-25个循环:94度5秒 。
68度4分钟
注意:
我们建议使用降落PCR反应,这就要求GSP的Tm值≥70度。
当循环结束时,利用1.2%琼脂糖凝胶电泳分析每一个管中的产物5μl,使用适当的分子量marker。
•可以根据你的基因的特异性来设计最理想的循环参数。如果看不到带或者只有微弱的带,在68度多加5个循环。最佳的延伸时间取决于扩增条带的长度。如果片断的长度在2-5kb的时候,经常使用4min,0.2-2kb的时候将延伸时间减到2-3min,对于5-10kb的条带,延伸时间增加到10min。
RACE产物的验证:
应该对RACE的片段进行验证,以此来确定是否已经扩增了理想的产物。如果得到的是多条带或者研究的是多基因家族的成员,验证是非常有用的。
有3种验证RACE产物的方法:
(1)比较由GSP和NGSP获得RACE产物。
(2)Southern blot 。
(3)克隆并测序
我们建议最好测得RACE产物的部分序列。有的时候需要嵌套引物的存在。
比较由GSP和NGSP获得RACE产物。
对于5‘末端的RACE产物,比较由AP1和GSP1扩增出来的产物和由AP1和NGSP1扩增出来的产物。
对于3‘末端的RACE产物,比较由AP1和GSP2扩增出来的产物和由AP1和NGSP2扩增出来的产物。这对于鉴定多条带是否是上一个PCR的特异性产物是非常有用的。
如果条带是正确的,在嵌套PCR反应中的条带应该是略微小一些。基本PCR和嵌套PCR产物的迁移率的不同取决于cDNA结构中GSP1和嵌套引物的位置。
RACE产物的克隆和测序:
可以利用胶回收试剂盒来回收RACE产物,此试剂盒适合回收2.5kb以下的RACE产物;对于长的片段,可以通过电洗脱获得好的结果。如果你选择使用其他的纯化方法,最后用Tricine-EDTA buffer 30μl重新悬浮DNA样品。
电泳5μl回收的样品来鉴定回收的质量。
将回收的PCR产物直接克隆到/A型的PCR克隆载体中。另外还可以利用接头和/或cDNA合成引物中的Not1、Srf1、Xma1、ECOR1等酶切位点,将产物克隆到常规载体中 。
对于5‘端的RACE产物,我们建议挑取至少8-10个不同的克隆以获得5‘端的最大可能性的序列。(反转录并不总是进行到mRNA模板的5’末端,尤其是长模板。另外,T4 DNA聚合酶会移走5‘末端的0-20个碱基。)
一旦鉴定了含有插入片断的克隆,应该获得多的序列信息。理想的是,可以对整个开放读码框进行测序。包括5‘和3‘的非翻译区。
全长cDNA的获得
通过部分或全部测序鉴定了RACE产物后,可以通过两种选择获得全长的cDNA。
通过PCR的方法。
通过克隆的方法。
通过PCR的方法获得全长cDNA:
扩增长的cDNA需要较长的延伸时间,但是如果延伸的时间过长,可以产生拖带,所以要慎重的设计引物。
根据从5‘和3‘RACE产物获得序列信息设计5’和3‘GSP引物。这些引物应该来自cDNA的3’或者5‘的末端,应该是23-28nt长。不应该在引物的末端加上限制性位点,这样会导致高背景。在某些时候可以设计3’和5‘的嵌套引物。但是还是应该先利用一对引物进行PCR反应。
通过PCR的方法获得全长cDNA:
进行如下的热循环:
94度30秒
25个循环94度5秒
72度2-15分钟
延伸的时间应该等于预期的cDNA长度加上2分钟。例如:预期得到6kb的条带,用6+2=8分钟的延伸时间。
注意:如果没有条带或者条带弱,增加5个循环;或者优化PCR的条件。
通过PCR的方法获得全长cDNA:
在1.2%的琼脂糖凝胶上分析5μl的样品。通常情况下,可以见到一条单一带,如果这样,利用胶来纯化全长的cDNA。
制备1.2%的TAE buffer制备琼脂糖凝胶。不使用TBE buffer,TBE的胶很难制备全长的cDNA。
将剩下的45μl反应物点样,选用适当的marker。
利用长波紫外观察cDNA(≥300nm)切下全长的cDNA。注意:应该尽量减少紫外对cDNA的照射。
通过PCR的方法获得全长cDNA:
利用胶回收试剂盒回收cDNA。此试剂盒适合回收2.5kb以下的RACE产物;对于长的片段,可以通过电洗脱获得好的结果。如果你选择使用其他的纯化方法,最后用Tricine-EDTA buffer 30μl重新悬浮DNA样品。
将全长的cDNA克隆到T/A型的PCR克隆载体中。
通过克隆产生全长的cDNA:
如果你已经获得了含有重叠部分的5‘和3’RACE产物,同时在cDNA的重叠部分含有一个酶切位点的话,通过克隆技术可以获得全长的cDNA。
利用酶切获得的3‘和5’扩增产物,并且利用T4 DNA连接酶将它们连接起来。利用接头和cDNA合成引物中的内切酶将最终的全长cDNA克隆到载体中。
在哺乳动物基因组中,NOT1和Srf1酶切非常稀少,大约106bp才出现一次,因此在绝大多数的cDNA中是不出现的。
山地车是专门为越野(丘陵,小径,原野及砂土碎石道等)行走而设计的自行车,一九七七年诞生于美国西岸的旧金山。当时,一群热衷于骑沙滩自行车在山坡上玩乐的年轻人,突发奇想:“要是能骑着自行车从山上飞驰而下,一定非常有趣了。”于是便开始越野自行车的设计,正式命名为山地车则是在两年后的事。从此,“速降竞技”作为体育比赛中的一个新项目崭露头脚,运动员骑山地车沿规定的下坡线路高速滑降,速度快者为胜,吸引了众多的爱好者。自行车虽然始于欧洲,但美国人发明的山地车却一扫传统的自行车概念,将一股新风吹遍全球。